細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法和PEI Prime ™的介紹

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來越廣泛。

轉(zhuǎn)染，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介導(dǎo)方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)；生物介導(dǎo)方法，有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。

理想細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)，是目前轉(zhuǎn)染效率高的方法，同時(shí)具有細(xì)胞毒性很低的優(yōu)勢(shì)。但是，病毒轉(zhuǎn)染方法的準(zhǔn)備程序復(fù)雜，常常對(duì)細(xì)胞類型有很強(qiáng)的選擇性，在一般實(shí)驗(yàn)室中很難普及。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法，則各有其特點(diǎn)。

需要指出的一點(diǎn)，無論采用哪種轉(zhuǎn)染技術(shù)，要獲得*的轉(zhuǎn)染結(jié)果，可能都需要對(duì)轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化。影響轉(zhuǎn)染效率的因素很多，從細(xì)胞類型、細(xì)胞培養(yǎng)條件和細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，到轉(zhuǎn)染方法的操作細(xì)節(jié)，都需要考慮。

常見的轉(zhuǎn)染方法是脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法：

陽離子脂質(zhì)體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用，將DNA分子包裹入內(nèi)，形成DNA脂復(fù)合物，也能被表面帶負(fù)電的細(xì)胞膜吸附，再通過融合或細(xì)胞內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前實(shí)驗(yàn)室便捷的轉(zhuǎn)染方法之一，其轉(zhuǎn)染率較高，優(yōu)于磷酸鈣法。由于脂質(zhì)體對(duì)細(xì)胞有一定的毒性，所以轉(zhuǎn)染時(shí)間一般不超過24小時(shí)。常用細(xì)胞類型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。

美國(guó)serochem公司成立于2019年，目標(biāo)是使基因治療和生物制劑價(jià)格合理。目前，該公司主要進(jìn)行PEI Prime™?相關(guān)的兩款產(chǎn)品（液體和固體兩種）。

PEI是聚乙烯亞胺的縮寫。在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負(fù)電的DNA牢固結(jié)合，并賦予凈陽離子電荷，使DNA進(jìn)入細(xì)胞。當(dāng)下，PEI是流行的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑HEK293和CHO懸浮培養(yǎng)液。而serochem旗下的PEI Prime™是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑，旨在實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)量，可重復(fù)性，和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)，且其是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的很好選擇，包括重組蛋白，抗體和病毒。

PEI Prime ™是基于PEI基礎(chǔ)上的高性能轉(zhuǎn)染試劑，是化學(xué)轉(zhuǎn)染中的陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑；在HEK293和CHO細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中具有高效性；制備簡(jiǎn)單，價(jià)格適中，適合大規(guī)模瞬時(shí)轉(zhuǎn)染；比PEI所需時(shí)間較少。

PEI Prime™的設(shè)計(jì)著眼于在PEI的可擴(kuò)展性基礎(chǔ)上，進(jìn)一步提高，這使其成為可以用于大規(guī)模瞬時(shí)基因表達(dá)的具有成本效益的試劑。無論轉(zhuǎn)染一毫升還是一百萬升培養(yǎng)基，我們都會(huì)提供較優(yōu)的性能，服務(wù)和價(jià)格。而北京百奧作為其國(guó)內(nèi)代理，本著一心為客戶著想，認(rèn)真為客戶負(fù)責(zé)的宗旨，介紹并推薦此產(chǎn)品。