技術(shù)文章
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1962年,倫納德·海弗里克(LeonardHayflick)取得一項(xiàng)重大發(fā)現(xiàn),即正常人類細(xì)胞在體外培養(yǎng)中的復(fù)制能力有限。這一發(fā)現(xiàn)tui翻了人們對培養(yǎng)細(xì)胞潛在永生性的長期信念,并對生命科學(xué)研究產(chǎn)生了深遠(yuǎn)的影響。同年,兩位在紐約格蘭德島的車庫工作的生物學(xué)家Bob和EarlineFerguson認(rèn)識到為科學(xué)研究提供動物血清的商業(yè)潛力。從這個(gè)小小的開始,Gibco血清越升至支持全球生命科學(xué)研究的前沿產(chǎn)品。胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分,不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子...
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免疫熒光(IF)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)檢測技術(shù)。可用于檢測和識別細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)及其他分子的亞細(xì)胞分布和遷移。那么你知道免疫熒光實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)有什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、設(shè)置對照可以使用陽性和陰性對照來確定結(jié)果的準(zhǔn)確性,并幫助確定任何問題的來源。二、樣品和試劑的存儲由于IF中所用抗體和實(shí)驗(yàn)樣品的熒光性質(zhì),因此必須適當(dāng)存儲。最好將熒光抗體和經(jīng)過IF處理的樣品都保存在wan全黑暗的環(huán)境中。使用琥珀色或鋁箔覆蓋抗體管。三、使用適當(dāng)?shù)墓潭▌┤┛?..
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免疫熒光(IF)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)檢測技術(shù)。可用于檢測和識別細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)及其他分子的亞細(xì)胞分布和遷移。那么你知道免疫熒光實(shí)驗(yàn)的步驟有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、細(xì)胞準(zhǔn)備對于單層生長的細(xì)胞,將細(xì)胞接種到預(yù)先處理過的蓋玻片的培養(yǎng)皿中,待細(xì)胞接近長成單層后取出蓋玻片,用PBS洗滌兩次。對于懸浮生長的細(xì)胞,取對數(shù)生長的細(xì)胞,用PBS離心洗滌(1000rpm,5min)兩次,然后用細(xì)胞離心甩片機(jī)制備細(xì)胞片或直接制備細(xì)胞涂片。二、固定根據(jù)需要...
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哺乳動物細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達(dá)高活性蛋白而被廣泛應(yīng)用。那么細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的原理是什么?讓我們一起來看看吧!哺乳動物細(xì)胞自身具有蛋白折疊和翻譯后修飾的功能,獲得的蛋白更具有天然活性。哺乳動物細(xì)胞生產(chǎn)蛋白的方式有兩種:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的特點(diǎn)是短期快速表達(dá),滿足蛋白的小量制備。而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染通過構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系能夠滿足蛋白的大量、長期生產(chǎn)。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的原理是指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導(dǎo)入到哺乳動物細(xì)胞內(nèi),該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。隨著細(xì)胞的生長分裂,...
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酶聯(lián)免疫吸附測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,簡寫ELISA或ELASA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。那么ELISA主要材料試劑有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、抗原和抗體在ELISA實(shí)施過程中,抗原和抗體的質(zhì)量決定實(shí)驗(yàn)是否成功的關(guān)鍵因素。本法要求所用抗原純度高,抗體效價(jià)高、親和力強(qiáng)。ELISA所用抗原有三個(gè)來源:天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于動物...
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