蛋白質凝膠電泳的原理是什么？有何注意事項？

你知道蛋白質凝膠電泳的原理是什么嗎？有何注意事項？讓我們一起來看看吧！一、原理將蛋白質樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉（SDS)以及硫基乙醇一起加熱，使蛋白質變性，多肽鏈內部的和肽鏈之間的二硫鍵被還原，肽鏈被打開。打開的肽鏈考疏水作用與SDS結合而帶負電荷，電泳時在電場作用下，肽鏈在凝膠中向正極遷移。不同的肽鏈由于在遷移時受到的阻力不同，在遷移過程中逐漸分開，其相對遷移率與分子量的對數間成線性關系。二、注意事項1.由于與凝膠聚合有關的硅橡膠稱、玻璃板表面不光滑潔凈，在電泳時會...

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蛋白質含量測定方法有哪些？

蛋白質含量測定實驗可以用于測定蛋白質濃度和檢測所提取的蛋白質含量，那么蛋白質含量測定方法有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、folin—酚試劑法這種蛋白質測定法是zui靈敏的方法之一。過去此法是應用zui廣泛的一種方法，由于其試劑的配制較為困難，近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即folin-酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深蘭色的原因是：在堿性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物...

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懸浮細胞培養的操作步驟與注意事項有哪些？

懸浮培養指的是一種在受到不斷攪動或搖動的液體培養基里，培養單細胞及小細胞團的組織培養系統，那么懸浮細胞培養的操作步驟與注意事項有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、步驟1.將準備好的凍存細胞放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對頂端進行消毒，用吸管將細胞轉移到含有5mlwan全MEM-10培養基的25cm2組織培養瓶中，輕輕搖動培養瓶，使細胞均勻分布于培養瓶中，放入5%CO2加濕培養箱中37℃培養過夜。3.將培養基吸出，用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆蓋細胞，消化30~40...

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貼壁細胞培養的步驟有哪些？

在動物細胞培養過程中，必須有可以貼附的支持物表面，其依靠自身分泌或培養基中的貼附因子才能在該表面生長增殖的離體動物的培養細胞。那么貼壁細胞培養的步驟有那些呢？讓我們一起來看看吧！1.將含有凍存細胞的安瓿放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有5ml起始培養基的25cm2組織培養瓶中，輕輕搖動培養瓶，使細胞均勻分布于培養瓶中，將其放入5%CO2加濕培養箱中37℃培養過夜。3.吸出起始培養基，換成適當的維持培養基。將細胞放回CO...

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如何確認RNA的質量？

樣本種類繁多且復雜，有些樣本，要想提取到質量良好的RNA是非常困難的，那么該如何確認RNA的質量呢？讓我們一起來看看吧！確認RNA的質量有以下兩種常見方法1）檢測RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0時，我們認為RNA中蛋白或者時其他有機物的污染是可以容忍的，不過要注意，當你用Tris作為緩沖液檢測吸光度時，R值可能會大于...

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