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PCR作為分子生物學中常用的技術之一,目的是通過引物的作用擴增DNA序列。那PCR引物設計的時候,應該注意哪些問題呢?一、引物設計區域:最好在模板cDNA的保守區內DNA序列的保守區是通過物種間相似序列的比較確定的。在NCBI上搜索不同物種的同一基因,通過序列分析軟件(比如DNAman)比對(Alignment),各基因相同的序列就是該基因的保守區。二、引物設計長度:15~30bp最you引物長度(primerlength)常用的是18~27bp,但不應大于38,因為過長會導...
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一、什么是胎牛血清?胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結血液的液體部分,不含細胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對細胞生長至關重要的營養和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養細胞的維持和生長至關重要。FBS還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質和激素。FBS應用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細胞培養中,其濃度高達20%甚至更高,它提供許多促進細胞存活和增殖的必需營養素和生長因子。然而,需要注意的是,人類細胞培養物中的FBS可能會引入研究成果。...
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購買血清后,在使用的過程中,會遇到這樣那樣的問題,如何處理呢?讓我們一起來看看吧!一、血清保存的最好方法?建議血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶,建議無菌分裝于適當的滅菌容器內冷凍備用。二、如何解凍血清,才能保證其質量不會受損?建議將血清從冷凍箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解凍,然后在室溫下全融,解凍過程中必須規則地搖晃均勻。三、為什么血清在解凍后會出現絮狀沉淀?應該怎樣處理?血清中絮狀沉淀產生的原因有很多,其中最pu遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致,而血纖維蛋...
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胎牛血清(FBS)是最chang用的血清添加劑,因為它富含生長因子、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養基也逐漸走紅,但許多細胞系未必適用,并且存在費用較高和生長較慢等缺點。那么,研究人員在評估FBS的質量時,需要注意些什么呢?目前,市場上存在著不同等級的FBS。由于FBS關乎細胞活力和實驗重復性等重要的參數,故在質量方面是絕對不能含糊的。讓我們一起來看看哪些方面是需要注意的吧!一、可追溯性對于科學家而言,最大的風險也許是FBS的純度大打折扣,這可能導致細胞培養實驗的效...
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分子生物學實驗室的有毒試劑,你知道多少?一起來看看吧一、DMSO(二甲基亞砜)DMSO,用途廣泛,用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機溶劑的極為重要的非質子極性溶劑。對皮膚有極qiang的滲透性,有助于藥物向人體滲透。也可作為農藥的添加劑。也是一種十分重要的化學試劑。DMSO也是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,改變生物膜對電解質、藥物、毒物和代謝產物的通透性。但是研究表明,DMSO存在...
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