細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染有哪些區(qū)別？

在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞轉(zhuǎn)染是一項(xiàng)常用的技術(shù)，用于引入外源基因、表達(dá)蛋白或沉默目標(biāo)基因等。其中，細(xì)胞的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是兩種常見的轉(zhuǎn)染方式。細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染有哪些區(qū)別？讓我們一起來看看吧！類別特點(diǎn)適用范圍穩(wěn)定轉(zhuǎn)染長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)目標(biāo)基因長(zhǎng)期功能研究和穩(wěn)定表達(dá)需求的實(shí)驗(yàn)可通過篩選和擴(kuò)增獲得穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系長(zhǎng)期細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞系建立使用脂質(zhì)體、病毒載體或DNA轉(zhuǎn)染等方法大規(guī)模蛋白表達(dá)和基因敲入研究瞬時(shí)轉(zhuǎn)染快速實(shí)現(xiàn)臨時(shí)的基因表達(dá)短期功能研究和臨時(shí)表達(dá)需求的實(shí)驗(yàn)無需篩選和擴(kuò)增細(xì)胞系短期細(xì)...

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封閉液有哪幾種？怎么選？

完整的Western實(shí)驗(yàn)過程比較長(zhǎng)，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)沒有結(jié)果，或者是顯色后背景高了，背景高，目的蛋白顏色對(duì)比不明顯，要么看不清，圖片展示不理想，更別說進(jìn)行數(shù)據(jù)分析了。顯色背景高的原因有很多:封閉問題，洗脫問題，一抗二抗問題等。其中最xian著的就是封閉問題。最常見的封閉就是脫脂奶粉和牛血清白蛋白（BSA），當(dāng)然還有血清，魚皮明膠，聚乙烯吡咯烷酮，封閉液。我們到底應(yīng)該選擇哪種封閉液？怎么選擇呢？讓我們一起來看看不同的封閉液的優(yōu)缺點(diǎn)吧！一、脫脂奶粉最pian宜而且最好買的封閉劑就屬脫脂...

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磁珠法核酸提取都分為哪幾個(gè)步驟？

核酸作為一切分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)，其提取通常是開啟生物學(xué)研究的第一步，而且提取的核酸質(zhì)量高低也是決定下游實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素之一。常見的核酸提取方法有酚氯仿抽提法、高鹽沉淀法、柱式法和磁珠法，其中，磁珠法核酸提取都分為哪幾個(gè)步驟？讓我們一起來看看吧！第一步：裂解核酸必須從細(xì)胞或其他生物物質(zhì)中釋放出來，細(xì)胞裂解可通過機(jī)械作用、化學(xué)作用、酶作用等方法實(shí)現(xiàn)。其中，酶作用主要是通過加入溶菌酶或蛋白酶（蛋白酶K、植物蛋白酶或鏈霉蛋白酶）以使細(xì)胞破裂，核酸釋放。蛋白酶還能降解與核酸結(jié)合的蛋...

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流式細(xì)胞儀分為哪些類別？

自1973年世界di一臺(tái)商用流式細(xì)胞儀問世以來，經(jīng)過近50年的發(fā)展流式細(xì)胞儀在結(jié)構(gòu)上發(fā)生了一系列的演變：由簡(jiǎn)單到復(fù)雜、由單激光到多激光、由單色到多色、由分析到分選、從傳統(tǒng)流式到質(zhì)譜流式&光譜流式等。流式細(xì)胞儀分為哪些類別？讓我來帶你了解了解！1.分析型流式細(xì)胞儀用于快速分析檢測(cè)細(xì)胞組分及顆粒懸液，通過同時(shí)檢測(cè)分析液流中細(xì)胞上多種信號(hào)，對(duì)細(xì)胞加以細(xì)致的區(qū)分鑒別，目前臨床檢驗(yàn)和科學(xué)研究主要使用此類流式細(xì)胞儀。2.分選型流式細(xì)胞儀用于快速分離獲取目的細(xì)胞，在分析檢測(cè)基礎(chǔ)上，通過分選...

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流式細(xì)胞術(shù)在科研方面有哪些應(yīng)用？

流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種對(duì)處在快速流動(dòng)中的細(xì)胞或其它生物微粒逐個(gè)進(jìn)行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù)。它集計(jì)算機(jī)技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、熒光標(biāo)記技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體，按照細(xì)胞或生物顆粒的物理或化學(xué)性質(zhì)，同時(shí)具有分析和分選細(xì)胞或生物顆粒的功能。流式細(xì)胞術(shù)在科研方面有哪些應(yīng)用？讓我們一起來看看吧！一、細(xì)胞凋亡檢測(cè)在正常細(xì)胞中，細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）位于胞漿側(cè)。細(xì)胞凋亡中期，PS外翻。AnnexinV是一種Ca2+依賴的對(duì)PS具有高度親和力的磷脂結(jié)合蛋...

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